pcr扩增的原理

PCR（聚合酶链式反应）技术的基本原理与 DNA 的天然复制过程相似，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR 由变性、退火、延伸三个基本反应步骤构成。

①模板 DNA 的变性：模板 DNA 经加热至 93℃左右一定时间后，使模板 DNA 双链或经 PCR 扩增形成的双链 DNA 解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备。

②模板 DNA 与引物的退火（复性）：模板 DNA 经加热变性成单链后，温度降至 55℃左右，引物与模板 DNA 单链的互补序列配对结合。

③引物的延伸：DNA 模板与引物结合物在 72℃、DNA 聚合酶（如 TaqDNA 聚合酶）的作用下，以 dNTP 为反应原料，靶序列为模板，按碱基互补配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板 DNA 链互补的半保留复制链。

重复循环变性、退火、延伸这三个过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这些新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需要 2～4 分钟，2～3 小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。